在肿瘤免疫学实验研究领域，组织样本单细胞悬液制备是单细胞测序实验中至关重要的工作，其质量好坏直接影响了后续建库的成败以及测序数据产出质量。因此，单细胞悬液制备除了需要有经验丰富的人员来进行指导/操作，还得依靠靠谱的单细胞悬液制备仪来助力。

　　实验设备：单细胞悬液制备仪 JX-CKSM-6WK

　　应用领域：肿瘤研究、心血管研究、干细胞研究、免疫研究、神经科学研究

　　大鼠肿瘤组织样品的实验操作过程：

　　01组织获取、清洗

　　1.荷瘤鼠麻醉后处死，取肿瘤组织200-500 mg，迅速置于装有4 ℃不含血清的培养液或PBS的无菌培养皿中，将培养皿放置冰上快速拿回实验室。(一小时内分离肿瘤细胞)。

　　2.上述组织使用含有1 %双抗的PBS洗涤三次，眼科剪去除组织块中的脂肪、坏死组织等无用组织。

　　02酶消化、机械分离

　　1.用剪刀将组织切割成1-2 mm³左右的小块，用4℃ D-Hank's液洗1次，尽量去除剪碎组织过程中产生的组织碎片。

　　2.样品管内加入200-500 mg组织及消化酶，放入单细胞悬液仪，选择内置程序运行。

　　3.消化完成后，适当震荡样品管，观察浑浊度与颜色，并用细胞筛过滤出单细胞悬液，随后加入消化终止液，最终得到细胞悬液。

　　03洗涤和重悬（选择性去红）

　　1.如有大量红细胞污染，加入红细胞裂解液（自备）裂红，230-250 g离心后加入PBS重悬，随即230-250 g离心洗涤并培养基重悬。

　　2.结果：单细胞悬液应当保持95 %以上活率（PI染色流式或台盼蓝染色镜检），总数目在3×107左右。

　　实验操作流程图：

　　大鼠肿瘤组织样品处理的实验前后对比效果图：

　　实验解决的问题：

　　从组织获得存活单细胞是一个复杂过程，处理当中常存在处理时间长、细胞处于逆境状态时间长、细胞得率低、细胞存活率低、操作繁琐等问题。使用JX-CKSM-WK系列单细胞悬液制备仪，具有起始组织量小，时间短，细胞得率高，细胞活性高的特点；常应用于流式细胞术/单细胞测序/原代细胞培养等实验。