骨骼肌细胞因其纤维化结构紧密、细胞间连接复杂，传统手工制备方法不仅耗时费力，更易因机械剪切力失控导致细胞活率骤降（活率常低于60%），严重制约了科研研究的实验效率和数据的可靠性。为更好地制备骨骼肌细胞悬液，今天我们就选用一款实验室人人推荐的净信JX-DLDXB系列单细胞悬液制备仪，来进行实验操作。

　　实验目的：借助单细胞悬液制备仪与配套试剂，将小鼠骨骼肌组织快速解离为形态完整、活率高的单细胞悬液，满足单细胞测序、细胞培养、流式分析等后续实验需求。

　　实验材料与仪器清单：

　　1.实验材料：小鼠骨骼肌组织、骨骼肌组织单细胞解离酶(货号：MJ010)、红细胞裂解液(货号：MJ103)、预冷PBS缓冲液、台盘蓝染色液。

　　2.仪器清单：无菌手术器械套装(眼科剪、镊子)、单细胞悬液制备仪、高速冷冻离心机、倒置显微镜、无菌EP管、精准移液系统。

　　单细胞制备仪对小鼠骨骼肌组织悬液制备的实验步骤：

　　1.试剂预处理：需要先将骨骼肌组织单细胞解离酶置于冰上解冻，全程保持冰浴状态备用，避免酶活性流失。

　　2.小鼠处理与组织取材：采用断颈法处死小鼠后，迅速分离出骨骼肌组织，用预冷PBS缓冲液反复冲洗，去除表面血液、筋膜等杂质。称取约130mg洁净的骨骼肌组织，剪碎、放入单细胞制备仪的研磨管中，加入所需酶。

　　3.仪器消化：采用断颈法处死小鼠后，迅速分离出骨骼肌组织，用预冷PBS缓冲液反复冲洗，去除表面血液、筋膜等杂质。称取约130mg洁净的骨骼肌组织，剪碎、放入单细胞制备仪的研磨管中，加入所需酶。

　　4.红细胞裂解与清洗：用3-5倍体积的红细胞裂解液重悬细胞沉淀，冰上孵育10分钟，期间用移液系统轻柔吹打2-3次。随后再次以 4℃、300g离心5分钟，弃上清后用预冷PBS缓冲液清洗重悬2次，去除残留裂解液。

　　5.细胞重悬与镜检质控：用适量PBS缓冲液重悬细胞沉淀，取少量细胞悬液与台盘蓝染色液按比例混合，滴加至细胞计数板上，通过倒置显微镜观察细胞形态并计算活率。

　　单细胞制备仪对小鼠骨骼肌组织悬液制备的实验结果与优势：

　　1.核心结果：

　　①胞形态：经仪器制备的细胞透亮圆润，形态完整，无明显细胞碎片和组织残渣。

　　②细胞活率：台盘蓝染色检测显示，活细胞率稳定≥95%，满足高要求实验标准。

　　③细胞数量：离心后可见明显细胞沉淀，重悬后的单细胞悬液均匀分散，无团聚现象。

　　2.仪器制备化优势：

　　①效率提升：组织破碎、酶解消化等步骤通过仪器标准化完成，全程耗时缩短 30% 以上。

　　②稳定性强：避免手动操作的力度、速度差异，实验结果可重复性高。

　　③损伤更小：仪器研磨和振荡温和，减少细胞机械损伤，显著提升细胞活率。

　　上海净信单细胞悬液制备仪可在15-30分钟内完成骨骼肌细胞悬液的制备，不仅显著缩短了实验处理时间，同时更是将细胞活率提升至95%以上，为其提供“快、准、稳”的标准化解决方案。让小鼠骨骼肌单细胞悬液的制备更高效、更稳定，实现效率与活率双突破，为后续实验提供可靠的样本保障。