对于单细胞悬液的制备和其单细胞的测序,通常我们都会选择应用专用的单细胞悬液制备仪来进行样品细胞的实验操作。
单细胞制备仪是一种集成金属浴消化与温和剪切组织的新一代细胞悬液制备设备,应用于流式细胞术/单细胞测序/原代细胞培养等实验,具有起始组织量小,时间短,细胞得率高,细胞活性高的特点。采用国际DIN方法设计,低噪音,使用方便,性能稳定,带加热功能,对样品的消化处理过程始终处在恒温状态。
此次应用单细胞制备仪的实验目的就在于对小鼠的动物组织肝、肾、脾单细的胞悬液制备,同时在实验前还需准备一些相配适用的研磨套装管、滤管、移液枪、培养皿、镊子、手术刀、PBS液、净信消化酶、终止液等器具耗材试剂的应用。
制备单细胞悬液的操作步骤:
1、开机预热,打开加热模块1,加热模块2
2、取活体组织后,放入PBS液中去红,然后取样品
3、把消化酶用移液器加入研磨套装管中,将加满消化酶的离心管放入预热模块中预热若干分钟
4、将处理好的组织用镊子转移到加满消化酶的离心管中
5、将装满消化酶和组织的离心管放置到加热板中,选择25分钟程序,开始运行
6、程序结束取出离心管,将消化好的组织液转移到过滤管中,即得到一管单细胞悬液
肝脏组织
脾脏组织
肾脏组织
应用单细胞悬液制备仪不但对样品组织的利用率高、单细胞产出高,且单细胞化过程高效。在针对组织单细胞测序时,可快速完成单细胞化处理,获得高产且活率在85%以上的单细胞;在针对临床穿刺样本,可使组织的利用率达到百分之100,细胞产量可达10万个以上v;在针对不同的样本选择不同的程序(6组预设程序),处理样品量可达4*2ml/6*2ml/8*2ml;在针对原细胞培养样本时,可在15min内完成组织到单细胞过程,降低细胞逆境时间,提高细胞存活率。