疾病的实验探究已逐渐深入到细胞和基因水平中;在疾病的实验探究过程中,单细胞悬液制备尤为重要,它可助力于对单个细胞的形态、结构、功能及基因表达等的深入了解,揭示生命活动分子机制。
那对于类器官培养前处理-肺该如何进行单细胞悬液制备呢?
实验案例:
1.实验目的:取实验室模型小鼠肺组织制备单细胞悬液,进行类器官培养,展开药物筛选研究。
2.实验样品:模型小鼠一只
3.实验耗材:消化酶、终止液、移液枪枪头、台盼蓝染料
4.实验设备:单细胞悬液制备仪JX-CKSM-6WK
小鼠肺组织单细胞悬液制备的实验步骤:
1.打开仪器电源,点击管架加热和模块加热;消化酶和终止液冷水解冻
2.小鼠呼吸麻醉后,解剖取出肺组织,预冷PBS冲洗血水
3.用眼科剪剪取组织样本,放置于加满消化液的消化管
4.先放置于管架中预热几分钟,然后转移至运行模块中,关闭仪器盖子,选择对应程序,运行结束,取出消化管
5.组织块消化成浑浊的细胞悬液,用70μm的滤网过滤细胞,加入终止液终止消化,离心,重悬,后续可进行类器官培养
实验图片:
小鼠肺组织单细胞悬液制备的实验结果:
用台盼蓝染色,上细胞计数仪进行得率和活率的分析
肺组织单细胞悬液的活率为93%
单细胞悬液制备仪是一种集成金属浴消化与温和剪切组织的新一代单细胞细胞悬液制备设备,应用于流式细胞术/单细胞测序/原代细胞培养等实验,具有起始组织量小,时间短,细胞得率高,细胞活性高的特点。采用国际DIN方法设计,低噪音,使用方便,性能稳定,对样品的消化处理过程始终处在恒温状态。