实验目的:此次实验主要是为了帮助我们解开视网膜疾病的神秘密码,为找到治疗这些疾病的方法打下坚实基础。
实验设备:单细胞悬液制备仪 JX-CKSM-4WK
实验准备:单细胞悬液制备仪、消化酶和终止液、实验小鼠、显微镜、培养皿、PBS缓冲液、解刨工具等
样本取材:麻醉后、用镊子撑开小鼠眼睑,取出眼球,在显微镜下小心的从眼球壁上分离出视网膜,将分离出的视网膜放到预冷PBS缓冲液中
小鼠视网膜单细胞悬液制备的实验操作步骤:
1.在实验开始前,需要先使用冷水将其消化酶和终止液进行解冻
2.打开仪器、点击管架加热和模块加热,将设备加热到37℃
3.将预冷PBS中的视网膜捞出,放到加满消化酶的消化管中,上机预热3min后使用程序2进行消化
4.待仪器运行程序结束后即可取出处理后的样品效果,再使用70μm筛网对其进行过滤
5.把过滤后的样品加入终止液,进行离心,重悬等实验操作
6.在显微镜下观察细胞形态
小鼠视网膜单细胞制备的样品实验结果:
在显微镜下观察,可以看到视网膜单细胞形态良好、活细胞数量较多,后续可进行流式分析,单细胞测序等,可进一步实验探究视网膜中一个个独立细胞的神奇奥秘。
单细胞悬液制备仪(控温型)是一种集成金属浴消化与温和剪切组织的新一代制备单细胞细胞悬液的设备,应用于流式细胞术/单细胞测序/原代细胞培/类器官研究等实验,具有起始组织量小,时间短,细胞得率高,细胞活性高的特点。采用国际DIN方法设计,低噪音,使用方便,性能稳定,对样品的消化处理过程始终处在恒温状态。