实验目的:根据用户实验需求,此次实验选用单细胞悬液制备仪对其小鼠小脑组织样品进行单细胞悬液的制备。
实验设备:单细胞悬液制备仪JX-CKSM-12WK
小鼠脑组织样品悬液制备的实验步骤:
1.实验准备:
01.在实验开始前,需要提前准备好单细胞悬液制备仪一台
02.消化酶、终止液(自配),需要将其进行低温保存,提前取出冷水解冻备用
03.模型小鼠一只
04.解刨工具一套
05.生理盐水、试剂等
2.实验操作流程:
01.提前冰浴解冻消化酶和终止液
02.打开管架加热和模块加热,对实验设备进行加热预热到一定温度
03.使用解刨工具对模型小鼠的脑组织样品进行获取
04.对获取到的小鼠小脑组织经过预冷PBS清洗后,用纸擦干,将其组织样品剪成米粒大小
05.将处理后的小鼠小脑组织放入消化管中,加入消化酶,上机预热几分钟后使用程序2进行消化
06.程序结束后取出,使用40μm筛网对其样品进行过滤
07对其样品悬液进行裂红、离心、重悬
08.使用细胞计数仪检测细胞活率
实验注意事项:为了达到更好的效果,需要将样本量剪成米粒大小;
组织块消化完全,细胞量充足,染色后上细胞计数仪,细胞得率和细胞活率符合客户要求,后面进行上机测序。
上图为实验后数据组织块消化完全,细胞量充足,染色后上细胞计数仪,细胞得率和细胞活率符合客户要求,后面进行上机测序。