你是否还在因为手工制备单细胞悬液的繁琐操作而耗费大量时间精力,影响实验进度?
你是否还在面对批量制备单细胞悬液时,细胞活率有高有低,难以保证实验结果的一致性而烦恼?
那你看到这里就对啦。上海净信的单细胞悬液制备仪可免费试用啦,同时还能让你的科研之路更加畅通无阻!!!
单细胞悬液制备仪适用于人和小鼠的各类细胞系、原代细胞以及干细胞的培养等。现有两种系列的单细胞制备仪可选择应用,分别是JX-CKSM系列和JX-DLDXB系列。
JX-CKSM系列制备仪拥有自行研发的运动方式和大量实验验证的优秀程序,针对不同细胞类型进行程序选择,适合临床穿刺等少量样本,或成批做的少量样本;实验设备能够实现高效的批量处理,为单细胞制备提供强大助力。
JX-DLDXB系列制备仪的处理量更大,适合处理组织量大、或处理组织种类多,需要每个通道单独运行的样本;该实验设备的每个管道均可独立运行,且能轻松应对大规模的单细胞制备任务。
针对不同的实验,选择适合的仪器,单细胞悬液制备仪器为科研实验人员提供高质量的单细胞悬液。
单细胞悬液制备的方案:
实验案例:
1.组织取样:采用颈椎脱位法处理小鼠后固定于手术台,于腹部喷洒 75%乙醇消毒,对皮肤和肌肉层进行中线切口,取要制备的实验样本,放入1XPBS溶液中,置于冰上,清洗组织表面血液。
2.预处理:将清洗后的组织,转移到新的1XPBS溶液或1640培养基中,用眼科剪剪碎至1-3mm小块(如果是肠道样本需剪开,用1XPBS清洗内容物,如果制备心肌细胞,需要出生不超过3天的乳鼠)。
3.加入消化酶:选择适合后续实验要求的消化酶,冷水解冻,将剪碎的样本放入消化管、加入消化酶,进行程序选择。
4.上机选择程序:将消化管放入仪器后,选择合适的程序,不同的样本均有其对应的程序,选择程序后,启动仪器即可。(JX-CKSM系列需要预热步骤,JX-DLDXB系列加热套直接加热,无需提前预热)
5.终止消化、过滤、离心、重悬:下机后,用消化酶配套的终止液进行终止,终止后用细胞筛进行过滤。流式分析、单细胞测序等需要确保单独的一个个的细胞,无细胞团,可用40um细胞筛或370-400目的纱布;原代培养等可用70-100um细胞筛或150-250目的纱布,在原代培养中有些量细胞团是可以的。过滤后采用230g的离心力,离心7min,弃上清,保留细胞沉淀,用dPBS进行重悬。
6.检测细胞活率和得率
实验室常用的检测细胞得率和活率的方法有三种:
1.细胞计数仪:可用台盼蓝进行染色,用细胞计数仪检测细胞得率和活率
2.流式分析:用死活染料进行染色(例如PI等),上流式细胞仪分析,圈门圈出死活细胞,查看细胞活率。
3.镜检:显微镜下查看细胞的状态,也可用死活染料染色,染上颜色的是死细胞,未染上的是活细胞,以此来判断视野中细胞的活率。
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