实验目的：根据用户实验需求，此次实验选用小鼠皮下黑色素瘤单细胞为样品，对其样品进行单细胞悬液的制备。

　　实验选用仪器：温控型单细胞悬液制备仪JX-CKSM-6WK

　　制备单细胞悬液的实验步骤：

　　1.在实验开始前，我们需要提前准备好单细胞制备仪JX-CKSM-6WK一台，温和型消化酶，终止液和洗涤管

　　2.在实验前，需要先将消化液和终止液冷水慢慢解冻，不可加热，不可剧烈摇晃；解冻后的消化酶和终止液放在冰上待用

　　3.选取健康小鼠1只，断颈处死，打开腹腔，取出肿瘤，放置冰块上

　　4.将其取出的样品组织放在培养皿中，用1XPBS洗涤器官等样品组织

　　5.将选取的组织块用眼科剪剪成糊状。（在一个干净的皿中放入1ml左右消化液，将我们取下的小块放进去剪成糊状，然后用移液枪将消化液和糊状样本放入消化管中）再将管中消化液补充满

　　6.开启实验仪器，将其样品管放入单细胞制备仪的管架上，管架预热5分钟

　　7.选择模块1进行实验，实验结束后仪器自动停止

　　8.流式分析或者单细胞测序用40um滤网、细胞培养可用70um-100um较粗一些的滤网过滤，加入终止液终止消化（消化液：终止液1：2）。管子放在冰上过滤

　　9.过滤后的悬液放到离心机上重悬（230g离心力，离心7分钟）

　　10.重悬后弃掉上清，加入少量DPBS打散混匀底部沉淀细胞，该悬液即单细胞悬液

　　实验注意事项：

　　1.组织一定要现取

　　2.取完组织后放到冰上保证细胞活性

　　小鼠肿瘤组织单细胞悬液的制备效果：