根据用户实验需求,此次实验取小鼠视网膜作为样品组织,对其进行制备获取单细胞悬液,以便进行后续的单细胞测序
实验设备:单细胞悬液制备仪 JX-CKSM-4WK
制备小鼠视网膜单细胞悬液的实验操作步骤:
1.在实验开始前,需要提前准备好单细胞制备仪一台,实验耗材以及小鼠样本等
2.把实验用到的消化酶和终止液进行提前冰浴解冻
3.打开热板加热和模块加热,将设备加热到37℃
4.小鼠处死后,在显微镜下的帮助下取出小鼠视网膜
5.把小鼠视网膜经过DPBS清洗后,放入消化管中,再加入消化酶,上机静置3min后使用程序2进行消化
6.待仪器程序结束后取出,即可使用40μm筛网过滤
7.进行后续实验的离心、裂红、重悬
实验操作注意事项:
1.清洗使用没有Ca2+和Mg2+离子的DPBS
2.需要在实验开始前提前将仪器加热,把酶和终止液提前解冻
3.后续做单细胞测序的单细胞悬液过滤需要使用40μm筛网进行应用
实验操作图:
小鼠视网膜单细胞悬液制备的实验结果图(台盼蓝镜检):